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哺乳动物细胞表达系统

平台介绍

哺乳动物细胞表达系统能够指导蛋白质的正确折叠,可提供复杂的N-糖基化和O-糖基化,磷酸化,乙酰化,r-羧化等多种翻译后加工修饰功能,可形成接近天然蛋白的蛋白质折叠。表达产物具有活性蛋白必须的空间结构和修饰,在分子结构、理化性质和生物学功能方面比原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统更接近于天然蛋白。哺乳动物细胞表达系统在在新基因的发现、蛋白质的结构和功能研究、生物药物和临床疫苗的研发和生产中起着极为重要的作用。勤邦生物建立了成熟的哺乳动物细胞表达系统及纯化服务平台,技术团队拥有丰富的蛋白表达经验,可提供哺乳动物细胞瞬时转染蛋白表达服务和哺乳动物细胞稳定转染蛋白表达服务。

服务项目

1.基因获取:根据CHO或HEK293密码子偏好性、GC含量、重复序列、mRNA的二级结构等综合考虑对目的序列进行密码子,合成基因序列。

2.质粒构建:制定灵活的表达载体构建方案,将目的基因亚克隆到合适的载体上,提高目的蛋白的表达量和活性。

3.细胞瞬时转染:短期内获得少量可溶性目的蛋白,用于基因产物的快速表达和蛋白的小规模制备。

4.稳定细胞系构建:筛选可以稳定、高表达目的蛋白的稳定细胞株。

5.重组抗体制备:根据客户提供抗体基因序列,制备嵌合抗体、单链抗体、抗体片段、双特异性抗体等。

6.放大培养:可根据客户需求,提供mg级至g级的哺乳动物细胞表达蛋白。

7.蛋白纯化:可通过亲和层析、离子交换、透析超滤、凝胶过滤等方法分离纯化目的蛋白。

8.蛋白鉴定:SDS-PAGE、WB、ELISA、质谱分析等。

9.蛋白标记:HRP、FITC等。

服务与价格

编号 服务名称 服务流程 服务内容 周期 客户提供 交付内容 价格
QB601023
哺乳动物细胞瞬时转染蛋白表达
表达载体构建

基因分析优化

亚克隆设计

基因合成

亚克隆至载体

2-3周
基因序列
表达质粒
构建报告
 
 
请咨询
瞬时转染表达小试

无内毒素质粒提取
重组质粒转染目的细胞
瞬时表达小试,条件优化
SDS-PAGE及WB分析鉴定

2-4周
 

 

瞬时转染细胞裂解液
细胞上清小样
蛋白表达鉴定报告
细胞上清纯化小试

细胞上清纯化
纯化蛋白鉴定检测

1-2周
 
纯化蛋白(电泳纯>90%)
蛋白纯化鉴定报告
蛋白表达与纯化

放大培养
细胞上清纯化
纯化蛋白鉴定检测

3-4周
 
纯化蛋白(电泳纯>90%)
蛋白纯化鉴定报告
QB601024 哺乳动物细胞稳定转染蛋白表达 表达载体构建

基因分析优化
亚克隆设计
基因合成
亚克隆至载体

2-3周   表达质粒 请咨询
瞬时转染表达

无内毒素质粒提取
重组质粒转染目的细胞
瞬时表达小试,条件优化
SDS-PAGE及WB分析鉴定

2-4周   瞬时转染细胞裂解液
细胞上清小样
蛋白表达鉴定报告
稳定细胞系构建

细胞亚克隆
筛选建立稳定表达细胞系

1.5-2.5月   稳定表达细胞株
蛋白表达与纯化

放大培养
细胞上清纯化
纯化蛋白鉴定检测

2周  
纯化蛋白(电泳纯>90%)
蛋白纯化鉴定报告

 

服务流程

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